2012-05-19
Žmogaus papilomos viruso (ŽPV) nustatymas PGR metodu
Šiandien žinoma virš 120 žmogaus papilomos viruso (ŽPV) atmainų (genotipų, tipų). Daugiau kaip 40 ŽPV genotipų plinta lytiniu keliu ir infekuoja lyties organų gleivines. Apie 20 iš jų priskiriami aukštos rizikos ŽPV genotipams, kurie yra gimdos kaklelio vėžio (GKV) ir kitų anogenitalinių piktybinių navikų rizikos faktorius. Aukštos rizikos ŽPV genotipams priskiriami 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 55, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 ir kt.
Likę ŽPV genotipai priskiriami žemos rizikos žmogaus papilomos virusams, kurie sukelia gėrybinius odos pažeidimus, dažniausiai odos ir gleivinių karpas (kandilomas), kvėpavimo takų papilomatozę.
Dauguma ŽPV infekcijų praeinančios ir žmogui nesukelia jokių klinikinių požymių: 70% naujų ŽPV infekcijų praeina per vienerius metus, o maždaug 90% - per dvejus metus. Vidutinė naujos infekcijos trukmė yra 8 mėnesiai. ŽPV ilgą laiką gali persistuoti organizme nesukeldamas jokių pastebimų simptomų. Tačiau susidarius palankioms sąlygoms (nusilpus organizmo imuninei sistemai ir kt.), sąveikoje su kitais onkogeniškumą sąlygojančiais veiksniais aukštos rizikos ŽPV genotipai sukelia intraepitelinius ląstelių pažeidimus.
Epitelio ląstelių histologiniai pokyčiai dažnai pastebimi praėjus 8-10 metų po infekcijos (tai priklauso nuo ŽPV tipo). Šie virusai, patekę į epitelio ląsteles, kurį laiką persistuoja ląstelės viduje episomos pavidalu, o praėjus tam tikram laikui integruojasi į infekuotos ląstelės genominę DNR ir sukelia ląstelių proliferaciją (nenormalų vystymąsį). Įvairių epitelio ląstelių displazijų atvejais (ikivėžinė stadija) 88% atvejų ŽPV randamas integruotas į žmogaus genomo DNR.
Pagrindinis gimdos kaklelio vėžio rizikos veiksnys yra aukštos rizikos ŽPV. Moterys, kurioms diagnozuotas gimdos kaklelio vėžys ir kurioms atlikta biopsija, 99,7% atvejų turėjo aukštos rizikos ŽPV. Moteris nejaučia jokių užsikrėtimo virusu ar gimdos kaklelio vėžio vystymosi simptomų. Todėl labai svarbu anksti nustatyti GKV rizikos veiksnius ir pirmuosius, dar akimi nepastebimus ląstelių pakitimus. Kiekviena moteris turi galimybę atlikti citologinį gimdos kaklelio tyrimą. Tačiau citologinio tepinėlio jautrumas nėra pakankamas nustatant pirmuosius ląstelių pažeidimus. Į pagalbą gali ateiti jautrūs ir specifiški molekulinės biologijos metodai, įgalinantys nustatyti viruso genetinę informaciją (DNR). ŽPV diagnostikai naudojamas PGR (polimerazės grandininės reakcijos) metodas leidžia nustatyti labai mažus viruso kiekius mėginyje (20-50 viruso DNR kopijų).
SORPO medicinos tyrimų centre ŽPV tyrimas atliekamas moterims ir vyrams. Tiriamoji medžiaga moterims – nuograndos nuo gimdos kaklelio gleivinės, vyrams –nuodramdos iš šlaplės (vyras prieš tyrimą turi būti nesišlapinęs 3-4 val.) arba "pirminės porcijos" rytinis šlapimas, surinktas į 50-100 ml šlapimo indelį. Iš nuograndų ėminio išskiriama DNR ir atliekamas ŽPV tyrimas PGR metodu.
Yra keletas ŽPV tyrimo galimybių:
• Bendras ŽPV tyrimas apima 43 ŽPV genotipų – aukštos, žemos ir nenustatytos rizikos. 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 55, 56, 59, 66, 68, 73, 82; žemos rizikos: 6/11, 40, 42, 44, 54, 61, 70, 72, 82; ir 14 nenustatytos rizikos ŽPV genotipų, kurie veikdami su aukštos rizikos ŽPV genotipais sulekia pakitimis epitelinėse ląstelėse: 27, 30, 32, 34, 57, 62, 64, 69, 71, 83, 84, LVX82, LVX160, CP6108 ir kt. Jeigu atlikus šį tyrimą pacientas gauna „teigiamą“ rezultatą, tai reiškia, kad jo mėginyje buvo rastas vienas ar keli iš minėtų ŽPV virusų, tačiau neidentifikuotas jo tipas. „Neigiamas“ rezultatas reiškia, kad minėtųjų genotipų ŽPV viruso nerasta.
• Norint nustatyti konkretų ŽPV genotipą, galima atlikti ŽPV tipavimą iš jau turimo mėginio arba iš naujai paimtos medžiagos (jei nebuvo atliktas bendras ŽPV tyrimas). Vieno tyrimo metu galima nustatyti (galima rinktis):
43 genotipai: 19 aukštos rizikos ŽPV genotipų: 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 55, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82; 10 žemos rizikos: 6/11, 40, 42, 44, 54, 61, 70, 72, 82; ir 14 nenustatytos rizikos ŽPV genotipų, kurie veikdami su aukštos rizikos ŽPV genotipais sulekia pakitimis epitelinėse ląstelėse: 27, 30, 32, 34, 57, 62, 64, 69, 71, 83, 84, LVX82, LVX160, CP6108.
16 genotipų: 14 aukštos rizikos ŽPV genotipų (16, 18, 31, 33, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66) ir 2 žemos rizikos: 6/11.
8 aukštos rizikos ŽPV genotipus (16,18, 31, 33, 39, 52, 56, 58).
arba tik 16,18 genotipai .
ŽPV tipavimas atliekamas ir nenustačius bendro ŽPV. Kiekvienam ŽPV genotipui atliekama PGR reakcija ir pateikiamas kokybinis atsakymas: „teigiamas“ (arba „rasta“, jei randamas konkretus tipas ir „neigiamas“ (arba „nerasta“), jei nerandama.
Tyrimas atliekamas moterims - iš gimdos kaklelio nuograndų, vyrams - iš "pirminės porcijos" rytinio šlapimo arba šlaplės nuograndų.
Tyrimo trukmė – 2-3 dienos. ŽPV tyrimas ir genotipavimas SORPO laboratorijoje atliekamas darbo dienomis. Pacientai tyrimams priimami kiekvieną dieną.
Tyrimų atsakymus prašome atsiimti per 1 mėnesį atlikus tyrimą. Vėliau atsakymai perkeliami į SORPO medicinos tyrimų centro archyvą. Archyvinė tyrimų atsakymo kopija kainuoja 19 Lt.
TYRIMUS GALIMA ATLIKTI ANONIMIŠKAI.